152_091-017AP-TW
發佈日期 :
2009-04-29
| I259206 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 具有腫瘤相關基因與細胞激素基因之DNA疫苗及其合成方法(全文下載) A DNA VACCINE CONTAINING A TUMOR ASSOCIATED GENE AND A CYTOKINE GENE AND THE METHOD PRODUCING THEREOF |
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| 2006/08/01 | |||||||||||||||||||||||||||||
| I259206 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 2002/09/24 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 091121934 | |||||||||||||||||||||||||||||
| C12N-015/66;A61K-039/00 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 33-22 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 郭雨嵐;林發立 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 本發明係關於一DNA疫苗及其合成方法，其係利用DNA重組技術於一載體上共同構築一段腫瘤相關基因與一段細胞激素基因，前述DNA疫苗之效用在於可共同表現前述之腫瘤相關抗原與細胞激素以達到增強免疫反應及達到抑制或減緩腫瘤細胞生長之效果。 | |||||||||||||||||||||||||||||
| 1.一種DNA疫苗,其係於一含適當啓動子或轉譯調控序列之載體上以融合方式構築至少包括: 一段neu基因;及 一段介白素-2基因; 以製得一具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗。 2.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其中前述之適當啓動子係可為一能夠於哺乳動物表現之啓動子。 3.如申請專利第2項所述之DNA疫苗,其中前述之啓動子至少包括CMV、PSV或LTR。 4.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其中前述之轉譯調控序列係可為一段IRES。 5.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其中前述之neu基因與介白素-2基因之表現可由一個或一個以上之啓動子啓動。 6.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其中前述之neu基因係可為一段完整之neu基因。 7.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其中前述之neu基因較佳係為一段編碼neu蛋白細胞外區域之截取之N'-neu基因。 8.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其中前述之介白素-2基因較佳係為介白素-2之成熟基因片段。 9.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其所含之基因順序可為neu基因在介白素-2基因之前或之後。 10.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其中前述之neu基因與介白素-2基因之構築形式係可為一融合基因形式由同一啓動子啓動。 11.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其較佳係為由一CMV啓動子啓動之N'-neu-介白素-2融合基因之DNA疫苗。 12.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其攜帶形式至少可以透過反轉錄病毒載體、腺病毒載體、腺衛星病毒載體、微脂粒或直接以DNA形式施用。 13.如申請專利第1項所述之DNA疫苗,其施用DNA疫苗之方式至少包括皮下注射、肌肉注射、口服、噴霧或基因槍注射。 14.一種合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,至少包含下列步驟: 設計含適當限制切位點之引子序列; 利用聚合連鎖反應技術分別放大並獨立出前述neu基因與前述介白素-2基因;及 利用適當之限制與結合分別將前述neu基因與介白素-2基因以融合方式共同構築至一含適當啓動子或轉譯調控序列之載體上。 15.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之啓動子可以為一能夠於哺乳動物表現之啓動子。 16.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之啓動子至少包括CMV、PSV或LTR。 17.如申請專利第14項所述之合成具有基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之轉譯調控序列可為一段IRES。 18.如申請專利第14項所述之合成具有基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之neu基因與介白素-2基因之表現可由一個或一個以上之前述啓動子啓動。 19.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之neu基因可以為一段完整之腫瘤相關基因。 20.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之neu基因較佳係為一段編碼neu蛋白細胞外區域之截取之N'-neu基因。 21.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之介白素-2基因較佳係為介白素-2之成熟基因片段。 22.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之DNA疫苗所含之基因順序可為neu基因在介白素-2基因之前或之後。 23.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述之neu基因與介白素-2基因之共同構築形式可以為一融合基因形式由同一前述啓動子啓動。 24.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述DNA疫苗較佳係為由一CMV啓動子啓動之N'-neu-介白素-2之融合基因之DNA疫苗。 25.如申請專利第14項所述之合成具有neu基因與介白素-2基因之DNA疫苗之方法,其中前述DNA疫苗之攜帶形式至少可以透過反轉錄病毒載體、腺病毒載體、腺衛星病毒載體、微脂粒或直接以DNA形式施用。 26.如申請專利第14項所述之合成具有腫瘤相關基因與細胞激素基因之DNA疫苗之方法,其中前述之DNA疫苗施用方式至少包括皮下注射、肌肉注射、口服、噴霧或基因槍注射。 圖式簡單說明: 圖一係本發明實施例一所設計之引子序列。 圖二係本發明實施例一所構築融合N'-neu-介白素-2之DNA疫苗之示意圖。 圖三係本發明實施例二、三及四之實驗流程。 圖四係本發明實施例二融合N'-neu-介白素-2之DNA疫苗抑制腫瘤之療效。 圖五係本發明之實施例三及實施例四,比較分別施打生理食鹽水(圖五a)、N`-neu DNA疫苗(圖五b)、N'-neu與介白素-2之個別DNA疫苗或融合N'-neu-介白素-2之DNA疫苗(圖五c)或融合N'-neu-介白素-2之DNA疫苗(圖五d)所得之小鼠生存率結果圖。 |
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| 專利權異動 |
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| 申請案件狀態 |
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